化妆品中氨基酸含量的测定步骤
2019-05-15 14:15 0次
随着大家的生活水平提高，平时使用的化妆品种类也是多如牛毛，其实化妆品的好坏跟其氨基酸的含量是有关系的。下面给大家介绍一下具体的测定步骤。
1、原理
蛋白质物质经水解成氨基酸，而氨基酸在一定的PH条件下，与茚三酮反应生成蓝紫色化合物，对其进行比色定量测定，从而计算出相应的氨基酸含量。
2、测定步骤
1、原理
蛋白质物质经水解成氨基酸，而氨基酸在一定的PH条件下，与茚三酮反应生成蓝紫色化合物，对其进行比色定量测定，从而计算出相应的氨基酸含量。
2、测定步骤
2.1标准曲线的绘制
准确移取氨基酸标准溶液0.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mL(相当于氨基酸0，40，80，120，160，200pg)分别置于25mL刻度试管中，加水补充至4mL，然后各加入2%茚三酮溶液和磷酸盐缓冲溶液各1mL，摇匀。置水浴锅中加热15min， 取出冷却至室温， 加水至刻度， 摇匀。静置15min， 用分光光度计在570nm波长下以水作参比，用1cm比色皿测定试液的吸光度，绘制吸光度对氨基酸含量(pg)的标准曲线。
2.2样品前处理
2.2样品前处理
准确称取样品约5g(准确至0.001g) 于试管， 加人6mol/L盐酸溶液约10mL~20mL于沸水浴中水解约6h(对乳化体可先将试样置于水浴锅中破乳1h~2h) 。加人约1g~2g蜡块约30min后， 取出试管冷却。去除蜡块，将溶液移至100mL烧杯中，在酸度计上用碱液调节pH至7.5~8.0，再将溶液移人100mL容量瓶中并加水稀释至刻度，摇匀待用。
2.3测定
移取试液1mL~4mL置于25mL刻度试管中，以下按2.1测定步骤进行。测得吸光度，通过标准曲线计算氨基酸的含量，同时做一空白样。
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